Проба на антибиотики для определения эффективности антибиотиков

Рубан Мария

Терапевт

Терапевт

Проба на антибиотики используется для определения эффективности антибиотиков, которая может это проверить при созданных подходящих внешних условиях. Их ингибирующее действие затем изучается  на соответствующих микроорганизмах.

Чувствительность пробы на антибиотики исследует действенность препарата в подавлении роста микроорганизмов, которые являются причиной заболевания. Проба на чувствительность к антибиотикам проводится на инфицированном микроорганизме, который находится в клинических образцах физиологических жидкостей, таких как кровь или моча, взятых у наблюдаемого пациента.  Изоляцию и опознавание патогенных организмов, вызывающих заболевание, необходимо провести перед назначением соответствующего антибиотика для теста. Изолированный от образца анализа пациента организм в большинстве случаев выращивается в питательной среде с кислотностью pH 7.0. Затем, культуру засевают соответствующим раствором антибиотика, используемого для борьбы с заболеванием, и фиксируют эффективность замедления роста микроорганизма.

Проба на антибиотики в физиологической жидкости

Метод Стоука определяет чувствительность к антибиотику при помощи инокуляции контролируемого организма на одной части пластины, в то время как оставшаяся часть пластины населяется тестируемым организмом. Диски, помещенные на внутреннюю поверхность, позволяют сравнить зоны ингибирования.

Так как известно, что антибиотик работает на контролируемом организме, его эффективность на тестируемом организме может быть легко измерена посредством сравнения двух зон. Данный тест использует процесс сухой химической обработки, основанный на импрегнирующих пластиковых полосках с различной концентрацией антибиотика. Проба на антибиотики в физиологических жидкостях проводится для проверки больных раком пациентов, которые проходят химиотерапию вследствие возросшего риска инфекций, чтобы убедиться в соответствии  назначенных антибактериальных препаратов, используемых для предотвращения токсичности при передозировке.

Различные методы проведения проб на антибиотики

Тип, уровень pH и объем среды, используемой для выращивания культуры, возраст культуры, размер посевного материала – все это важные факторы, влияющие на результаты пробы. Даже температура во время инкубации и период инкубации могут повлиять на исход микробной пробы. 

Технологии, адаптированные для теста на микробную чувствительность к определенным антибиотикам, называются методами антибиотической пробы. Метод разжижения в пробирке и использование дисков антибиотической пробы являются двумя самыми популярными используемыми методами. Первый метод предполагает проверку чувствительности микроорганизмов к антибиотикам,  готовится серийный раствор антибиотика в подходящей среде. Каждая пробирка с различной концентрацией антибиотика заселяется определенным количеством микроорганизмов и инкубируется на заданный период времени. Пробирка с наименьшей концентрацией антибиотика, где сдерживается рост микроорганизма из-за отсутствия плотности, определяется как таковая с минимальной ингибирующей концентрацией.

Проба антибиотических дисков проводится с использованием агаровой пластины с тестируемым организмом и бумажного диска, пропитанного раствором антибиотика соответствующей концентрации. Все это помещается на поверхность пластинки. Так как рост организма и введение антибиотика происходит в одно и то же время, это создает циркулярную зону ингибирования вокруг диска, где антибиотик останавливает рост организма. Диаметр этой зоны зависит от концентрации антибиотика в диске  и его влияния на рост микроорганизма. Многочисленные диски, содержащие различные антибиотики или один антибиотик в разной концентрации, могут быть использованы для сравнения и выбора противомикробного агента, который станет наиболее эффективным в наименьшей концентрации для лечения заболевания. Важно определить правильную концентрацию антибиотиков, так как с повторным использованием недостаточной дозы бактерии способны вырабатывать сопротивление препарату. Для рутинных тестов использование метода дисковой диффузии является наиболее принятым.

Существует два различных метода проведения проб на чувствительность к антибиотикам. Первый метод проводится с использованием метода цилиндрической пластинки, второй – метод анализа в пробирках с использованием турбидиметрической пробирки.

Вследствие того, что данные пробы могут дать различные результаты, важно стандартизировать среду обитания культуры и контролировать условия исследования. Если в процессе были допущены погрешности, результаты могут не быть стандартизированы и, таким образом, будут не удовлетворительными. Далее можно узнать, как проводятся эти тесты:

Метод цилиндрической пластины

Данный тест используется для определения чувствительности организма. Этот организм обычно изолируется от пациента  перед началом теста. Это метод, при котором из цилиндра, помещенного на инокулированную поверхность,  распределяется раствор антибиотика. После культивирования измеряется диаметр ингибированной зоны. Этот диаметр зависит от концентрации используемого антибиотика и его особой активности. Данный метод популярен и используется в коммерческом изготовлении антибиотиков.

Результат такой пробы может помочь врачу определить тип лекарств, которые необходимо назначить. Если тест показал, что организм восприимчив к антибиотику, большая вероятность, что он будет уничтожен, когда антибиотики начнут взаимодействовать с микробами в кровотоке.

Метод турбидиметрической пробирки

При данном методе создается определенный раствор антибиотика. В жидкость добавляется микробная культура. Наибольшее преимущество данного метода в том, что он требует относительно короткого инкубационного периода. Однако он также имеет и большой недостаток. Присутствие инородных материалов может стать препятствием для роста микробов, что повлияет на результаты пробы. Этот метод, тем не менее, является подходящим, когда образцы чисты.

Проба на антибиотическую защиту – еще одна проба, которая может быть проведена для того, чтобы проверить способность микроба вживаться в эпителиальные клетки и причинять им ущерб. Такой тест может помочь врачам определить курс лечения заболевания, вызванного данными микроорганизмами, а также назначить соответствующее лечение, которое может получить пациент, зараженный определенным микробом. С тестом на антибиотическую защиту могут понадобиться дополнительные тесты.

Видео